豬白介素1α（IL-1α）ELISA試劑盒主要是用來做什么的？

　　豬白介素1α（IL-1α）ELISA試劑盒用于定量分析人血清、血漿、細胞培養上清液和體外細胞裂解液中IL-1的α含量。預包被的抗體是IL-1α單克隆抗體。檢測相抗體也是IL-1α單克隆抗體，將樣品標記的抗體依次加入酶標板孔中進行反應，然后用PBS或TBS洗滌。然后加入過氧化物酶標記的親和素反應；用PBS或TBS*清洗后，用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下變成藍色，在酸的作用下變成最終的黃色。樣本中的顏色深度與人類IL-1α正相關。
 

　　豬白介素1α（IL-1α）ELISA試劑盒原名淋巴細胞激活因子(LAF)，它激活T細胞和淋巴細胞產生和分泌IL-2，主要由單核細胞和巨噬細胞產生，在炎癥和免疫反應中起關鍵作用。Interleukin-1α和interleukin-1β結合相同的細胞表面受體并引起相同的生物反應。本試劑盒以人白介素-1α為標準，159個氨基酸，分子量為18kDa。

　　豬白介素1α（IL-1α）ELISA試劑盒操作步驟：

　　1、室溫平衡20分鐘后，從鋁箔袋中取出所需的條帶，剩余的條帶用自封袋密封，放回4℃。

　　2、設置標準孔、樣品孔和空白孔，空白孔不加任何東西；在標準孔μL中加入不同濃度的標準50。

　　3、在待測樣品孔中加入10個樣品μ50。加入樣品稀釋液40μL。

　　4、然后將辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100加入標準孔和樣品孔（空白孔不加）μ50。用封板膜密封反應孔，在37℃水浴或培養箱中孵育60min。

　　5、倒掉液體，在吸水紙上拍干，每個孔注滿洗液，靜置1min，扔掉洗液，在吸水紙上拍干，重復洗板5次（可以也可以用洗板機洗板）。

　　6、將50個底物A和B加入到所有μ50的孔中。在37℃避光孵育15分鐘。

　　7、在所有孔μ50中加入終止溶液50。在15min內測量每個孔在450nm波長處的OD值。